en کاهش زمان تصفیه آنتی ونوم پلی والان F (ab´)2 اسبی علیه عقرب زدگی بیوشیمی Biochemistry پژوهشي Research <span dir="RTL">روشهایی که امروزه توسط تولید کنندگان آنتی ونوم در سراسر جهان برای تولید آنتی ونوم های تغلیظ و تخلیص شده و فراکسیونهای حاصل از هضم آنزیماتیک گاماگلبولین استفاده می شود، درحقیقت روش پیشرفته تر از روش اولیه ای</span><span dir="RTL"> ا</span><span dir="RTL">ست که در سال 1938 توسط</span>&nbsp;&nbsp; pop <span dir="RTL">ابداع شد</span>.<br> <span dir="RTL">در این مطالعه که روش تصفیه ایمونوگلوبولین های تولید شده در اسب علیه شش گونه عقرب است، از کاپریلیک اسید (اکتانوئیک اسید) یک اسید چرب می باشد، استفاده می شود و هیچ تاثیری بر فعالیت آنزیم پپسین که در تصفیه آنتی ونوم ها در مرحله هضم</span> <span dir="RTL">Fc فراگمان ایمونوگلوبولین ها برای بدست آوردن </span>F(ab)₂<span dir="RTL">مورد استفاده قرار می گیرد، ندارد.</span><span dir="RTL">روش جدید برای تولید<br> آنتی ونوم های </span>F(ab)₂<span dir="RTL"> بکار می رود که در این روش آنتی سرم با مقدار مساوی از </span><span dir="RTL">هیدروکلریک</span><span dir="RTL">اسید 0/15</span> <span dir="RTL">مولار مخلوط شده تا pH=3/4 بدست آید و سپس پپسین به میزان660mg/L آنتی ونوم رقیق شده اضافه شده و برای مدت 4 ساعت در دمای C</span>&deg;<span dir="RTL">37&nbsp; قرار می گیرد تاهضم انجام شود. سپس pH را روی 4/8 با سدیم هیدروکسید 1/5 مولار تنظیم کرده، 1/1 درصد کاپریلیک اسید و 10 درصد سولفات آمونیوم اضافه و برای مدت 60 دقیقه مخلوط شده واز کاغذ صافی عبور داده می شود. کاپریلیک اسید با رسوب آلبومین و آمونیوم سولفات باعث کاهش کدورت می شود که نتیجه آن کاهش زمان هضم آنزیمی در فرآیند تصفیه سرم می باشد. </span><br> F(ab)₂<span dir="RTL"> تولید شده در اسب با استفاده از روش جدید تصفیه با کاپریلیک اسید از نقطه نظر بازده، خلوص و فعالیت ویژه قابل مقایسه با روش چند مرحله ای و زمان بر آمونیوم سولفات می باشد.</span> <div style="text-align: justify;"><strong>Background and Aims:</strong> In this study we improved the purification of immunoglobulins from equine antiserum raised against the venom of 6 types of scorption species. Caprylic acid (octanoic acid), a fatty acid, was found to have no effect on the activity of the enzymes pepsin, which is used in antivenom purification to digest Fc fragment of immunoglobulins to obtain F(ab^&acute;)₂.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> A new method was developed for the production of F(ab^&acute;)₂antivenom whereby whole equine antiserum was mixed with equal amount of 0.15 M HCl and pH 3.4 with pepsin 660 mg/L of diluted antivenom and incubated for 4 h at 37^&deg;C. After digestion the pH were brought to 4.8 with sodium hydroxide solution (1.5 M) and then 1.5% caprylic acid and 10% ammonium sulfate was added and mixed for 60 minutes and passed through filter paper.<br> <strong>Results:</strong> Caprylic acid caused precipitation of albumin, and ammonium sulfate reduced turbidity of solution, resulting in a reduced protein load presented to the digestion enzymes culminating in substantial reductions in processing time.<br> <strong>Conclusions:</strong> The equine F(ab^&acute;)₂ obtained using these novel caprylic acid methods were comparable in terms of yield, purity and specific activity to those obtained by multi-step and time consuming conventional salt fractionation with ammonium sulfate.</div> اسب, کاپریلیک اسید, F(ab´)2, پپسین, جداسازی اجزای آنتی ونوم, رسوب آمونیم سولفات Antiscorpion venom, Caprylic acid, Equine, Scorpion 49 58 http://ijml.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-343-1&slc_lang=en&sid=1 Abdolrahman Kordzangene عبد الرحمان کردزنگنه rahman_kordzangene@yahoo.com 0000-0001-5769-6801 No Department of Chemistry, Yazd Branch, Islamic Azad University, Yazd, Iran. گروه شیمی، واحد یزد، دانشگاه آزاد، یزد، ایران Razieh Mohebat رضیه موهبت raziehmohebat@yahoo.com 0000-0001-6732-2408 Yes Department of Chemistry, Yazd Branch, Islamic Azad University, Yazd, Iran. گروه شیمی، واحد یزد، دانشگاه آزاد، یزد، ایران Mohammad hossein Mosslemin محمدحسین مسلمین moslemin.mh@yahoo.com No Department of Chemistry, Yazd Branch, Islamic Azad University, Yazd, Iran. گروه شیمی، واحد یزد، دانشگاه آزاد، یزد، ایران Ahmad Taghavi Moghadam احمد تقوی مقدم taghavi84@gmail.com 0000-0003-0503-7462 No Research vice chancellor, Razi Serum and Vaccine Research Institute, Ahvaz branch, Ahvaz, Iran. معاونت پژوهشی، موسسه تحقیقات سرم و واکسن رازی، واحد اهواز، اهواز، ایران