International Journal of Medical Laboratory

en اثر عصاره متانلی گیاه شکرتیغال بر تولید تومور نکروزیز فاکتور آلفا از تمایز ماکروفاژهای موشی J774A.1 فعال شده با لیپوپلی ساکارید The Effect of Methanol Extract of Echinops Lasiolepis on TNF-α Production in LPS-activated J774 A.1 Mouse Macrophages ایمنی شناسی Immunology پژوهشي Research مقدمه: گیاهان دارویی همواره نقش حیاتی در زندگی انسان داشته اند. فاکتور نکروز تومور (TNF-α) یکی از سایتوکاین های التهابی مشتق شده از ماکروفاژبوده و در پروسه التهاب دارای اثرات چندجانبه می باشد. برخی از مطالعات نشان داده اند که تعدادی از گونه های گیاه شکرتیغال دارای فعالیت ضد التهابی می باشند.گونه lasiolepsis یکی از گیاهان بومی استان یزد می باشد. در این مطالعه فعالیت ضد التهابی این گیاه  بر ترشح TNF-α در ماکروفاژهای موشی J774A.1 مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: در ابتدا عصاره متانولی توسط روش ماسریشن تهیه گردید. 105 سلول به هر یک از چاهک های  میکروپلیت 96 اضافه گردید و با غلظت های مختلف عصاره و ng/ml100لیپوپلی ساکارید تیمار شد (به صورت سه بار تکرار). روش سایتوتوکسیسیتی MTT برای تعیین درصد سلول های زنده مورد استفاده قرار گرفت. غلظت هایی از عصاره که درصد سلول های زنده آنها بیشتر از 90% بود برای اندازه گیری میزان TNF-α در کشت ماکروفاژی با استفاده از روش Elisa، انتخاب گردید. نتایج: درصد زنده بودن سلول ها در غلظت های مختلف عصاره μg/ml (200، 100، 50، 10، 1، 1/0) به ترتیب 68/91، 27/95، 2/94، 8/90، 38/85 و 38/71 بود. بنابراین  سلول هایی که با غلظت های μg/ml 50 و کمتر تیمار شده بودند دارای درصد سلول های زنده  بیش تر از 90% بوده و سوپرناتانت سلولی آن ها برای سنجش TNF-α مورد استفاده قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که تمام غلظت های عصاره باعث کاهش تولید TNF-α می شود. بحث و نتیجه گیری : یافته های ما نشان می دهد که عصاره متانلی گونه lasiolepsis احتمالا از طریق کاهش تولید TNF-α درای اثرات ضد التهابی می باشد. Background and Aims: Plants as medicines have always played a vital role in human life. Tumor necrosis factor alpha (TNF)-α is one of the macrophage-derived inflammatory cytokine with pleotropic effects in the inflammation process. Some studies have been demonstrated that some of the Echinops species have anti-inflammatory activity. In fact, Echinops lasilepis is introduced as one of the native plants of Yazd. Thus, the present study intended to assess the inflammatory activity of Echinops lasiolepis on TNF-α secretion in J774 A.1 mouse macrophages. Materials and Methods: At first, methanol extract was prepared by maceration. 105 cells/ well were seeded in 96-well plate in triplicate and were treated with different concentrations of extract and 100 ng/ml Lipopolysaccharides. MTT cytotoxicity assay was used to determine the cell viability. Concentrations of extract with cell viability of more than 90% were used to evaluate the level of TNF-α in the macrophage culture using enzyme-linked immunosorbent assay. Results: Viability of cells at different extract concentrations of 0.1, 1, 10, 50, 100 and 200 µg/ml were 91.68, 95.27, 94.2, 90.8, 85.38 and 71.38, respectively. Therefore, cells treated with 50 μg/ml and lower concentrates of extracts showed more than 90% of viability and their supernatants were used for TNF-α assay. The study results revealed that all concentrations of extract reduced the production of TNF-α. Conclusions: Our findings showed that methanol extract of Echinops lasiolepis may have anti-inflammatory activity via reducing TNF-α production. Echinops lasiolepis, لاین سلولی J774A.1, فاکتور نکروز کننده تومور Echinops lasiolepis, J774A.1 cell line, Tumor necrosis factor 20 25 http://ijml.ssu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-36&slc_lang=en&sid=1 Fateme Sadat Dashti No Department of Immunology, Faculty of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Hossein Hadinedoushan Yes Department of Immunology, Faculty of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Department of Immunology, Reproductive Immunology Research Center, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran. Maryam Asadi No Department of Immunology, Faculty of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran.